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  • 己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列
  • 己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列
產(chǎn)品名稱:

己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-24
儲存條件
-20℃
中文名稱
己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列
有效期
6個月
單位

英文名稱
Hexokinase(HK) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC0740
規(guī)格50管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
主要用途己糖激酶(HK)活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC0740
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四粉劑×1-20℃保存
試劑五粉劑×1-20℃保存
試劑六粉劑×2-20℃保存

溶液的配制:
1、試劑二:臨用前加入30 mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑4℃保存4周;
2、試劑四:臨用前加入5mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑-20℃分裝保存4周;
3、試劑五:臨用前加入3mL 蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑-20℃分裝保存4周;
4、試劑六:臨用前取1支試劑六加入125 μL試劑一和125 μL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑4℃保存2。(該試劑為凍干試劑,可能存在肉眼觀察試劑量相差較大甚至量很少的現(xiàn)象,此現(xiàn)象不影響使用,實際質(zhì)量相同)
產(chǎn)品說明:
己糖激酶(Hexokinase,HK,EC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是葡萄糖分解過程中的第一個關(guān)鍵酶,催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點(diǎn)。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH 340nm有特征吸收峰。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項:

  1. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  2. 最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  3. 不同勻漿組織中HK活力不一樣,做正式試驗之前請做1-2次預(yù)試驗,若ΔA>0.5,則說明組織活力太高,必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液,或縮短反應(yīng)時間至2min,使ΔA<0.5,以提高檢測靈敏度。注意同步修改計算公式。

實驗實例:

  1. 稱取約0.1g 鼠腎,加入1mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,8000g4℃離心10min,取上清用提取液稀釋5倍后置冰上待測。之后按照測定步驟操作,用1mL石英比色皿測得計算A1=0.2252,A2=0.3084,ΔA=A2-A1=0.0832,計算己糖激酶活性得:HK活性(U/g 質(zhì)量)=1113×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)=4630.08U/g 質(zhì)量

  2. 稱取約0.1g 綠蘿,加入1mL提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。之后按照測定步驟操作,用1mL石英比色皿測得計算A1=0.1949,A2=0.2184,ΔA=A2-A1=0.0235,計算己糖激酶活性得:HK活性(U/g 質(zhì)量)=1113×ΔA÷W=261.56U/g 質(zhì)量

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

  1. Geng M T, Yao Y, Wang Y L, et al. Structure, expression, and functional analysis of the hexokinase gene family in cassava[J]. International journal of molecular sciences, 2017, 18(5): 1041.

  2. Zhou F, Du J, Wang J. Albendazole inhibits HIF-1α-dependent glycolysis and VEGF expression in non-small cell lung cancer cells[J]. Molecular and cellular biochemistry, 2017, 428(1-2): 171-178.

  3. Liu Y, Liang X, Zhang G, et al. Galangin and pinocembrin from propolis ameliorate insulin resistance in HepG2 cells via regulating Akt/mTOR signaling[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2018, 2018.

  4. Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019;153:152-160.(IF2.87)

參考文獻(xiàn):

  1. Pancera S M, Gliemann H, Schimmel T, et al. Adsorption behavior and activity of hexokinase[J]. Journal of colloid and interface science, 2006, 302(2): 417-423.

  2. [1] Galina A, da Silva WS. Hexokinase activity alters sugar-nucleotide formation in maize root homogenates[J]. Phytochemistry, 2000, 53(1): 29-37.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0540/BC0545 *酸激酶(PK)活性檢測試劑盒
BC0530/BC0535 磷酸果糖激酶(PFK)活性檢測試劑盒
BC2190/BC2195 磷酸烯醇式*酸羧化酶(PEPC)活性檢測試劑盒

己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列 己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒 糖酵解系列


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