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幽門螺桿菌的培養(yǎng)

發(fā)布日期: 2012-12-13
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幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細(xì)菌。長2.5~4.0μm,寬0.5~1.0μm。在胃粘膜上皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長時,除典型的形態(tài)外,有時可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。

用于培養(yǎng)的胃粘膜活檢標(biāo)本應(yīng)置于生理鹽水、營養(yǎng)肉湯或20%葡萄糖中,然后立即轉(zhuǎn)送到細(xì)菌室培養(yǎng)。如果標(biāo)本不能在4個小時內(nèi)培養(yǎng),就應(yīng)放在4℃保存,但不宜超過24小時。長期保存用于培養(yǎng)的活檢標(biāo)本的*方法是將其置于-70。C或液氮之中。培養(yǎng)幽門螺桿菌的培養(yǎng)基包括非選擇性及選擇性兩種。常用的非選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)為腦心浸液瓊脂、哥倫比亞瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂以及Wilkins-Chalgren瓊脂。培養(yǎng)基中需加7%-10%的去纖維蛋白馬血。羊血、人血、馬血清、氯化血紅素、淀粉、膽固醇或環(huán)糊精(cyclo 幽門螺桿菌dextrins)也可代替馬血。選擇培養(yǎng)基則是在上述 培養(yǎng)基中添加一定的抗菌藥物,如萬古霉素、啶酸、二性霉素B、多粘菌素B以及甲氧芐氨嘧啶(TMP)。常用的有Skirrow 配方及Dent 配方。前者原用于彎曲菌的培養(yǎng),亦可用于幽門螺桿菌培養(yǎng)。后者為前者的改良,即將多粘菌素用頭孢磺啶取代,因?yàn)樯贁?shù)(5%左右)幽門螺桿菌菌株對多粘菌素敏感。Drnt配方為萬古霉素(10mg/L)、頭孢磺啶(5mg/L)、TMP(5mg/L)以及二性霉素B(5mg/L)。有報(bào)道指出,部分菌株對啶酸敏感,因而培養(yǎng)基中應(yīng)盡量避免作用該抗生素。

 

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